La peinture montre la parenté de Jésus, combinée de manière inhabituelle avec la représentation du roi David, dont Jésus est issu par l'intermédiaire de son père Joseph. De nombreux personnages sont identifiés par des inscriptions. Marie et Anne sont assises sur le trône d'un édifice religieux. Jésus est debout sur la hanche de Marie, tenu par sa mère et sa grand-mère. Jean-Baptiste, représenté comme un jeune garçon, est agenouillé dans une adoration respectueuse devant l'enfant Jésus, tandis qu'au-dessous de lui repose l'Agneau de Dieu (Agnus Dei).
À la base du trône, David repose paisiblement dans son tombeau, symbolisant le lien ancestral avec Jésus à travers la lignée de Jessé, le père de David. Cette lignée sert de racine symbolique à l'arbre généalogique du Christ. La disposition des membres de la famille autour de Marie et d'Anne est symétrique, avec deux femmes de la famille assises au premier plan aux côtés de leurs enfants, probablement Marie Cléophas et Marie Salomé, les filles d'Anne issues de mariages ultérieurs. D'autres personnes se tiennent derrière le trône, formant un tableau harmonieux.
Juste à côté de Marie se tient saint Joseph, représenté avec une hache et un lys, symbolisant son rôle de charpentier et de gardien de la Sainte Famille. La composition culmine avec des rideaux froncés au sommet, à travers lesquels Dieu le Père émerge, accompagné du Saint-Esprit sous la forme d'une colombe, accordant sa bénédiction à son Fils. Huile sur toile, 117,5 × 102,5 cm
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